Ukuzaji wa njia isiyo ya moja kwa moja ya ELISA ya kugundua ugonjwa wa kuharisha wa papo hapo coronavirus IgG antibody kulingana na protini ya spike

Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) ni ugonjwa mpya wa ugonjwa wa homa ya nguruwe ambao unaweza kusababisha kuhara kwa maji kwa watoto wachanga na kusababisha hasara kubwa ya kiuchumi kwa tasnia ya nguruwe.Kwa sasa, hakuna njia inayofaa ya serolojia ya kutathmini ufanisi wa maambukizi ya SADS-CoV na chanjo, kwa hiyo kuna haja ya haraka ya kutumia kipimo cha ufanisi cha immunosorbent kilichounganishwa na enzyme (ELISA) ili kufidia upungufu huu.Hapa, plasmid recombinant inayoonyesha protini ya SADS-CoV spike (S) iliyounganishwa na kikoa cha binadamu cha IgG Fc iliundwa ili kutoa recombinant baculovirus na kuonyeshwa katika seli za HEK 293F.Protini ya S-Fc husafishwa kwa resini ya protini G na hubakiza utendakazi tena na kingamwili za Fc dhidi ya binadamu na za SADS-CoV.Kisha protini ya S-Fc ilitumiwa kukuza ELISA (S-iELISA) isiyo ya moja kwa moja na kuboresha hali ya majibu ya S-iELISA.Kwa hivyo, kwa kuchanganua thamani ya OD450nm ya sera hasi ya SADS-CoV 40 iliyothibitishwa na uchunguzi wa immunofluorescence (IFA) na uzuiaji wa Magharibi, thamani ya kukatwa iliamuliwa kuwa 0.3711.Mgawo wa mabadiliko (CV) ya sera 6 chanya za SADS-CoV ndani na kati ya uendeshaji wa S-iELISA zote zilikuwa chini ya 10%.Jaribio la utendakazi mtambuka lilionyesha kuwa S-iELISA haina utendakazi mtambuka na sera nyingine ya virusi vya nguruwe.Aidha, kwa kuzingatia ugunduzi wa sampuli 111 za kliniki za seramu, kiwango cha bahati mbaya cha jumla cha IFA na S-iELISA kilikuwa 97.3%.Mtihani wa kutoleta virusi na maadili 7 tofauti ya OD450nm ya seramu ilionyesha kuwa thamani ya OD450nm iliyogunduliwa na S-iELISA ilihusishwa vyema na mtihani wa kutoweka kwa virusi.Hatimaye, S-iELISA ilifanywa kwa sampuli 300 za seramu ya shamba la nguruwe.Seti za kibiashara za enterovirusi zingine za nguruwe zilionyesha kuwa viwango vya chanya vya IgG vya SADS-CoV, TGEV, PDCoV na PEDV vilikuwa 81.7%, 54%, na 65.3%, mtawaliwa., 6%, kwa mtiririko huo.Matokeo yanaonyesha kwamba S-iELISA ni maalum, nyeti, na inaweza kuzaliana, na inaweza kutumika kutambua maambukizi ya SADS-CoV katika sekta ya nguruwe.Nakala hii inalindwa na hakimiliki.Haki zote zimehifadhiwa.